Agar Salmonella-Shigella grund, förberedelse och användning



den Salmonella-Shigella agar också att det är känt som SS-agar är en måttligt selektivt och differentiellt medium, speciellt för isolering av enteropatogena bakterier av släktena Salmonella och Shigella, såväl från prover och klinisk miljö.

SS agar har en komplex komposition; Den består av köttextrakt, pepton, laktos, gallsalter, natriumcitrat, natrium-tiosulfat, ferricitrat, agar, neutralrött, briljantgrön och destillerat vatten. Med tanke på sin stora selektivitet är det möjligt att plantera prover med riklig blandad flora.

I mikrobiologiska laboratorier Salmonella Shigella medium används för att undersöka förekomst av Salmonella och Shigella i avföringsprover diarrheal, avloppsvatten, dricksvatten och livsmedel.

Ibland är det nödvändigt att använda pre-anrikningsbuljong (laktos buljong) och anrikning (selenit cystin) för att återvinna Salmonella-stammar.

Dessa steg krävs när misstänkta Salmonella i mycket låg mängd, eller där stammen skulle kunna missbrukas av egna processer av industriell produktion, bearbetade livsmedel främst. Det är också lämpligt att berika pallprover från patienter som har behandlats med antibiotika.

Därefter kan anrikningsbuljongen ympas i agar Salmonella Shigella och andra liknande organ, såsom xylos agar, lysin deoxicholat (XLD) agar och Hektoen enterisk (HE).

index

  • 1 Stiftelsen
    • 1.1 Näringsförmåga
    • 1.2 Konsistens
    • 1.3 Selektiv
    • 1.4 Differential
  • 2 Framställning
  • 3 Använd
  • 4 begränsningar
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 referenser

foundation

Varje komponent i Salmonella-Shigella-odlingsmediet har en specifik funktion, och blandningen som helhet ger den egenskaper som karakteriserar den.

Näringsrik kraft

Köttextrakt och pepton (kasein smälta och djurvävnad) tillhandahålla de nödvändiga näringsämnen (kväve, kol och vitaminer) för utveckling av mikroorganismer med förmåga att tolerera de andra komponenterna.

konsistens

Agar-agar är ansvarig för att ge solid konsistens till mediet.

selektiv

Detta medium är mycket selektivt eftersom det innehåller gallsalter, natriumcitrat och ljusgröna. Därför hämmar den tillväxten av alla gram-positiva bakterier och de flesta av de gramnegativa bacillerna, inklusive vissa koliformer.

Medan bakterier av släktet Salmonella och några stammar av Shigella stöder dessa föreningar.

Främst är mycket motståndskraftig mot gallsalter kön Salmonella, i den mån de kan leva i gallblåsan hos vissa patienter som utvisa bakterierna ständigt i avföring.

avvikelsen

Laktos är det fermenterbara kolhydratet som hjälper till att differentiera laktosfermentstammarna från de icke-fermenterande stammarna. Denna egenskap framgår av närvaron av pH-indikatorn, vilken i detta medium är fenolrött.

Laktosfermentstammarna ger röda kolonier, medan de icke-fermenterande stammarna är färglösa. Denna egenskap är viktig eftersom Salmonella och Shigella inte jäsar laktos.

Å andra sidan innehåller detta medium natriumtiosulfat som en källa till svavel och ferrikitrat som en källa till järn. Båda föreningarna kan differentiera bakterierna som är kapabla att producera vätesulfid. Dessa reagerar för att bilda en svart fällning av olöslig och synlig ferrisulfid.

Denna fastighet har några stammar av släktet Salmonella. Normalt är deras kolonier färglösa plana med en svart punkt i mitten av den. Resten av salmonellorna producerar inte H2S och utvecklas som färglösa kolonier.

Å andra sidan är kolonier av släktet Shigella färglösa plana utan att svarta.

beredning

Detta betyder att det är mycket enkelt att förbereda.

Väg 63 g av det dehydratiserade kommersiella mediet och lös upp i en liter destillerat vatten. Värm lösningen och rör om. Blandningen kan kokas i upp till några minuter.

Detta medium bör inte autoklaveras. Efter upplösningen serveras den direkt på enkla eller dubbla sterila plattor.

Att stelna är anordnade i plaqueros inverterade och förvaras i kylskåp (2-8 ° C) fram till användning.

Mediet efter beredning bör vara pH 7,2 ± 0,2 och orangefärgat.

Det är viktigt att låta plattorna tempereras innan proven sår. Du kan direkt fröa det ursprungliga provet, tömma materialet på en del av agar och sedan därifrån riva genom utmattning.

Vid användning av berikade buljonger, passera en del av selenitbuljongen och så med drigalski-spateln.

Inkubera vid 37 ° C i 24 timmar i aerobios.

Tänk på att mängden gram att väga och det slutliga pH-värdet i mediet kan variera från ett kommersiellt hus till ett annat. Medelens basplatta ger alltid indikationerna för dess framställning.

användning

Det används ofta i analysen av pallkulturer och i den mikrobiologiska studien av kvarvarande vattenprover, dricksvatten och mat.

Ofta framställs dubbla plattor, på ena sidan sätts Salmonella-Shigella agar och på andra sidan XLD agar.

begränsningar

-Vissa stammar av Shigella växer inte i detta medium. Därför rekommenderas det inte för primär isolering av detta släkt.

-Inte alla klara kolonier med ett svart centrum indikerar Salmonella; biokemiska tester måste utföras för att få en korrekt identifiering, eftersom kolonierna hos vissa stammar av Proteus är oskiljbara från Salmonella.

-Det dehydratiserade mediet bör vara försiktig med exponering för miljön, eftersom det är mycket hygroskopiskt. Därför måste den hållas i en torr och välsluten miljö. Öppna under mycket korta perioder.

-Över tiden kan gallesalterna i mediet falla ut och bilda en bild som liknar en mattad i agar men detta påverkar inte resultaten.

-Vissa stammar av Shigella kan långsamt fermentera laktos.

Kvalitetskontroll

För att bevisa att mediet fungerar korrekt är det lämpligt att plantera kända eller certifierade kontrollstammar och observera om tillväxten uppfyller de förväntade egenskaperna.

För detta ändamål, stammar av E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium eller Enterococcus faecalis.

De förväntade resultaten är:

Escherichia coli --rosa konvexa kolonier.

Enterobacter och Klebsiella- stora kolonier och röd eller rosa mucoid.

Shigella flexneri --klara eller färglösa platta kolonier.

Salmonella typhimurium - färglösa kolonier med svart centrum.

Enterococcus faecalis-- total hämning.

referenser

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Tillgänglig på: f-soria.es
  2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Finns på: bd.com
  3. Laboratorier Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Finns på: britanialab.com
  4. Valtek diagnostik. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010. Finns på: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnos av Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan. Editorial Panamericana S.A. Argentina.