Agar salt och manitol grund, förberedelse och användningar



den saltagar och mannitol eller salt mannitol är ett fast, selektivt och differentiellt odlingsmedium. Det skapades av Chapman för isolering av patogena Gram-positiva kocker, speciellt Staphylococcus aureus.

Det är dock också användbart att isolera Staphylococcus epidermidis, som ibland kan vara närvarande som en opportunistisk patogen, och Staphylococcus saprophyticus, igenkänt urinpatogen, bland andra arter.

Vissa Enterococcus kan växa i detta medium, liksom vissa Gram-positiva sporbildande baciller.

Detta medium är mycket användbart vid analys av kliniska prov, men det används också i mikrobiologiska studier av livsmedel och kvalitetskontroll av industriprodukter, bland annat kosmetika, läkemedel..

Saltad mannitolagar består av extrakt och peptoner av nötkött, tripein, mannitol, natriumklorid, fenolrött och agar.

index

  • 1 Stiftelsen
  • 2 Framställning
  • 3 användningsområden
  • 4 Kvalitetskontroll
  • 5 Slutliga överväganden
  • 6 referenser

foundation

Mannitolagar är selektivt tack vare den höga koncentrationen av salt som den har. Salthalten fungerar som en hämmande substans och förhindrar tillväxten av gramnegativa bakterier.

Det är också skillnad på grund av närvaron av mannitolkarbohydrat och fenolröd pH-indikatorn. Därefter producerar bakterierna förmåga att fermentera mannitol syror, surgöra mediet, vända kolonierna och medellånga.

Å andra sidan växer kolonier som inte fermenterar mannitol i mediet som tar näringsämnena som tillhandahålls av extrakten och peptonerna av kött och tripteína. Därifrån extraherar bakterierna kol, kväve, vitaminer och mineraler som är nödvändiga för deras tillväxt.

Kolonierna i detta fall kan vara svaga eller starka rosa och mediet förblir av samma färg eller förändringar i fuchsia.

Agar är substansen som ger konsistensen till mediet.

beredning

För att framställa en liter saltad mannitolagar, vägs 111 g av det dehydratiserade mediet i det kommersiella huset av preferens och löses i 1000 ml destillerat vatten med användning av en fiola.

Värme appliceras genom att ofta avlägsna mediet för att förbättra upplösningsprocessen. Låt det koka i en minut.

Placera fiola i autoklaven vid 121 ° C i 15 minuter.

Vid slutet av tiden tas fiolen ut ur autoklaven, får stå och serveras mellan 15 och 20 ml på sterila petriskålar när temperaturen är ungefär 50 till 55 ° C.

Det är tillåtet att stelna, beställa i inverterad form i plaqueros och hålla i kylskåp tills dess användning. Innan du planterar ett prov måste du vänta på att plattan tar temperaturen på miljön.

Plåtarna sås genom striering eller genom att såsa på ytan med en drigalski-spatel. Det slutliga pH-värdet i det framställda mediet bör vara 7,4 ± 0,2

Färgen på det dehydratiserade mediet är lätt beige och färgen av det framställda mediet är orangefärgat.

tillämpningar

På grund av sin höga selektivitet är detta medium idealiskt för plantering av prov med blandad flora, i vilken man vill leta efter närvaron av Staphylococcus aureus, som den främsta patogenen i detta släkt.

I den meningen är en av de vanligaste användningarna i den mikrobiologiska analysen av prover av pharyngeal exudates och nasal discharge, speciellt för att detektera asymptomatiska bärare av S. aureus.

Vissa länder har genomfört denna analys som ett obligatoriskt krav för personer som vill arbeta som matleverantörer.

Denna kontroll hindrar inhyrandet av personer som är bärare av S. aureus, så att man undviker massiv matförgiftning, på grund av konsumtionen av livsmedel förorenade med stafylokock enterotoxin.

Det kan också ingå i sådd av sårinfektioner, blodkulturer, CSF, bronchoalveolär lavage, bland andra..

Mannitol-salt-agar är användbar för urinkulturer återisolerades koloni från CLED agar eller biodagar som har avslöjat Gram Gram positiva kocker i kluster.

Det gäller även i mikrobiologisk analys av mat, dricksvatten, jord, bland andra applikationer.

Kvalitetskontroll

När en serie plåtar med saltade mannitolagar har framställts är det lämpligt att utföra en kvalitetskontroll. Kontrollstammar sås för att visa om det finns tillväxt eller inte.

Som positiv kontroll, kända stammar av Staphylococcus aureus. Det måste växa tillfredsställande genom att utveckla gula kolonier, och mediet blir också samma färg.

På samma sätt är det lämpligt att inkludera en känd stam av Staphylococcus epidermidis. Det måste växa tillfredsställande genom att utveckla rosa kolonier, och mediet håller samma färg eller mörknar i en starkare rosa färg.

Som en negativ kontroll används stammar som inte bör växa i detta medium. Till exempel kan du plantera en känd stam av Escherichia coli eller Klebsiella pneumoniae. Det förväntade resultatet är fullständig hämning, det vill säga ingen tillväxt.

Dessutom bör en platta utan ympning inkuberas. I det borde det inte finnas någon tillväxt, ingen färgförändring.

Det är viktigt att plattan inte används om det finns indikationer på försämring, såsom förorening, uttorkning, missfärgning, bland annat..

Slutliga överväganden

Vid användning av saltat mannitolagarmedium måste vissa viktiga aspekter beaktas:

-Att uppnå en tillväxt av gula kolonier indikerar inte att det är Staphylococcus aureus. Kom ihåg att vissa stammar av Enterococcus kan växa i detta medium och jäsa mannitol och vissa grampositiva sporbildande.

Därför är det viktigt att utföra ett gram till kolonin och ett katalastest.

-Å andra sidan måste det anses att andra arter av Staphylococcus skiljer sig från aureus De kan också fermentera mannitol. Därför är det viktigt att sub-odla kolonin till en näringsbuljong för att ta därifrån och utföra koagulastestet.

Bland de Staphylococcus arter av klinisk betydelse för människan som fermenterar mannitol är: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capit, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, bland annat.

Andra kan ge en variabel reaktion, det vill säga ibland positiv och ibland negativ. Vissa är S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, bland annat.

-Det rekommenderas inte att ta kolonier direkt från mannitolagar för att utföra koagulastestet, eftersom mediumets höga saltkoncentration kan störa resultatet.

-Slutligen rekommenderas att inkubera plattorna utsöndrade med saltade mannitol i upp till 48 timmar, på grund av att vissa stammar av S. aureus De kan långsamt fermentera mannitolen, även om detta inte är så vanligt.

referenser

  1. Laboratorier Britania. Mannitol salt agar. 2015. Finns på: britanialab.com
  2. "Saltad Mannitol Agar". Wikipedia, den fria encyklopedin. 31 okt 2018, 19:08 UTC. Jan 17 2019, 20:55, tillgänglig på: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnos av Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Panamericana S.A Redaktionell
  5. BD Laboratories BD Mannitol Saltagar. 2013. Finns på: bd.com.