Näringsrik agarfundament, förberedelse och användning



den näringsrik agar det är ett icke-selektivt och icke-differentiellt fast odlingsmedium. I denna miljö växer alla typer av bakterier inte från näringssynpunkt.

Det är ett enkelt medel och, trots sitt namn, innehåller ett lägre näringsvärde jämfört med andra liknande medier, såsom hjärthjärta infusionsagar eller tryptikas sojaagar.

Dess användbarhet i laboratoriet är mycket varierad. Huvudsakligen används för subkultur av arter, upprätthållande av stammar, räkning av kolonier, som grund för att förbereda blodagar, bland andra.

På samma sätt, på grund av sin ljusa beige färg, framställes pigmenter som alstras av vissa bakteriestammar, såsom det grönaktiga pigmentet av Pseudomonas aeruginosa, det tegelröda pigmentet som produceras av Serratia marcescens vid rumstemperatur, det gyllene gula pigmentet av Staphylococcus aureus, bland annat.

Dessutom är det ett av de mest ekonomiskt växande medierna som finns på marknaden.

index

  • 1 Stiftelsen
  • 2 Sammansättning
  • 3 Framställning
  • 4 användningsområden
    • 4.1 Som grund för framställning av blodagar
    • 4.2 Stimulera sporuleringen av sporbildande bakterier
    • 4.3 Stödunderhåll
    • 4.4 Kolonnräkning
    • 4.5 Utförande av diagnostiska test
    • 4.6 Återvinning av mesofil aerobt rekreativt saltvatten (stränder)
  • 5 referenser

foundation

Som redan nämnts är det ett mycket enkelt medel som bygger på att tillhandahålla näringsämnen för bakteriell tillväxt utan begränsning och utan komplicerade reaktioner för att tolka.

Eftersom mediet är genomskinligt är det idealiskt för att räkna kolonier genom såddsmetoden.

komposition

Den består huvudsakligen av kött- eller jästextrakt, peptoner eller pankreatisk gelatinuppslutning, agar-agar, natriumklorid och destillerat vatten.

Extraktet av kött eller jäst och peptoner representerar källorna till kol och väsentliga mineraler (kväve, fosfor och svavel), som kommer att användas av bakterier som energikälla och tillväxtfaktorer.

På samma sätt är agar-agar grunden för alla fasta odlingsmedier, som ersätter gelatin, vilket var den första basföreningen som användes av Robert Koch för att ge sin solida soliditet i media..

Agar är en polysackarid bestående av galaktos, galaktomannan, agaros och agaropektin. Den sätter vid 40 ° C och smälter nära 100 ° C.

För sin del ger natriumklorid mediet den osmolaritet som krävs för bakteriell utveckling.

Slutligen tjänar vattnet till att hydratisera och upplösa de lyofiliserade föreningarna. Destillerat vatten justerat till neutralt pH bör användas. Kranvatten bör inte användas eftersom det innehåller kalcium och magnesium som kan reagera med fosfaterna i mediet och bilda olösliga salter.

beredning

För en liter näringsagar bör 31 g av det dehydratiserade mediet vägas. Den placeras i en fiola och löses i en liter destillerat vatten. Värm över en värmekälla och blanda ständigt tills det kokar i 1 eller 2 minuter efter 5 minuter.

Placera fiola i en autoklav och sterilisera vid 121 ° C i 20 minuter.

Vid slutet av tiden avlägsnas den från autoklaven och serveras i sterila petriskålar, med hjälp av en laminärflödeskåp eller Bunsen-brännaren..

Om petriskålarna är disponibla (plast) ska mediet fördelas när agaren har en temperatur på ca 50 ° C för att förhindra att de deformeras av överdriven värme.

Låt solidisera och lagra i en platthållare inverterad och kyl till vid 2-8 ° C tills användning.

Plattorna måste tempereras innan de sås. Nourishing agarplattor ska inte användas om de är förorenade eller dehydrerade.

PH hos det framställda mediet bör justeras till 7,3 ± 0,2.

tillämpningar

Det är det enklaste odlingsmediet som används i mikrobiologilaboratoriet. Dess formulering är utmärkt för tillväxten av icke krävande bakterier.

Dess huvudsakliga användningsområden beskrivs nedan:

Som en bas för framställning av blodagar

Detta medium används ibland som en bas för att framställa blodagar, men det är inte den vanligaste basen.

Stimulera sporuleringen av sporbildande bakterier

Detta odlingsmedium är särskilt användbart för att stimulera sporuleringen av sporbildande bakterier såsom Bacillus sp.

För att göra detta sås en stam av släktet Bacillus och inkuberades i 24 timmar vid 37 ° C i aerobios. När kolonierna blivit vuxna utsätts plattan för en temperaturstress, det vill säga att kaminens temperatur ökas till 44 ° C och lämnas i 24 timmar mer eller det införs i kylskåp i 24 timmar.

Vid grödans slut utvidgas kulturerna och färgas med Gram stain eller Shaeffer-Fulton spore fläck. I dem kommer bacillerna med endosporer (sporer inuti bacillus) och exosporer (sporer utanför bacillus) att observeras..

Stöd underhåll

Vissa forskningslaboratorier eller universitetsundervisningslaboratorier måste behålla livskraftiga kliniskt viktiga bakterier så länge som möjligt, för att kunna använda bakteribanken (bakteriotheca) för forskningsarbete eller för att förbereda undervisningspraxis. Eleverna lär sig att manipulera och identifiera dessa mikroorganismer.

Den näringsrika agaren, liksom hjärninfusionsagar, kan användas för detta ändamål. Agar prepareras, hälls i bakelit-kapslade rör och lutas på en bas, på ett sådant sätt att agar stelnar bildar ett block i botten och en avfasning på ytan (flöjt topp).

Varje rör är märkt genom att placera namnet på de bakterier som ska planteras och datumet. På infallet planteras var och en av bakterierna och inkuberas i 24 timmar, när kolonierna odlas, lagras rören vid rumstemperatur.

Bakterioteca måste förnyas från 1 till 3 månader för att undvika förorening och uttorkning av mediet samt bakteriernas död.

Endast icke-krävande bakterier kan bibehållas på detta sätt.

Kolonnräkning

Även om det finns specialiserade medel för räkning av kolonier, såsom standardräkningagar, kan näringsagar användas för detta ändamål, antingen genom att såga på ytan med en drigalski-spatel eller genom djup. Därför är det mycket användbart vid mikrobiologisk analys av mat och vatten.

Utförande av diagnostiska test

Eftersom det är ett medium som inte innehåller blod eller något annat additiv, är det idealiskt att ta kolonier som odlas i detta medium för att utföra katalastestet.

På samma sätt är det på grund av sin klara färg indikerad att utföra oxidastest direkt på ett område av den utsöndrade agaren utan störning.

Återvinning av mesofil aerobt rekreations saltvatten (stränder)

Näringsämneagar framställd med 10% havsvatten är användbar för utvärdering av mesofila aerober i strandvatten.

Sålunda kan man uppskatta den faktiska kontaminering med vatten med dessa mikroorganismer, eftersom det i dessa prover resultaten är överlappade när grödor media ställdes på konventionellt sätt som används.

Detta demonstrerades av Cortez et al. år 2013 i ett forskningspapper.

Detta är förklarligt på grund av den abrupta förändringen som bakterierna genomgår när de går från en hyper-saltlösning till en låg saltmiljö, därför kommer mikroorganismerna i ett tillstånd av slöhet där de är livsdugliga men inte odlingsbara.

referenser

  1. "Näringsrik agar." Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 sep 2016, 20:33 UTC. 29 dec 2018, 21:04 en.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnos av Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Panamericana S.A Redaktionell.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier som är beredda med havsvatten på hälsoindikatorer i marina vatten i Chichiriviche spa, Falcón-staten, Venezuela. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M och Cardoso M. Mikrobiologisk kvalitet av vatten för inseminerande doser, för Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. Universitetet i Cadiz, 2: a upplagan. UCA Publications Service.