MacConkey Agar Foundation, förberedelse och användning



den MacConkey agar Det är ett fast odlingsmedium som tillåter den exklusiva isoleringen av gramnegativa baciller. Av denna anledning är det ett selektivt medium och möjliggör att skilja mellan fermentorer och laktos icke-fermenterande baciller, vilket gör en differentiell medium. Det är ett av de mest använda kulturmedierna i ett mikrobiologilaboratorium.

Detta medium används huvudsakligen för isolering av Gram-negativa baciller som tillhör familjen Enterobacteriaceae, inklusive opportunistiska och enteropatogena arter.

Det kan också användas för att isolera andra enteriska baciller som bor i mag-tarmkanalen, men hör inte till Enterobacteriaceae, som Aeromonas sp, Plesiomonas sp, bland annat.

Slutligen kan det isolera andra gramnegativa, icke-fermenterande glukosbaciller som finns i miljön, vatten eller mark, men som ibland kan vara opportunistiska patogener, såsom Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, bland annat.

index

  • 1 Stiftelsen
    • 1.1 MacConkey Agar
  • 2 Framställning
  • 3 Användningar av konventionell MacConkey agar
  • 4 Andra varianter av MacConkey agar
    • 4.1 MacConkey agar med sorbitol
    • 4.2 MacConkey Agar utan kristallviolett eller salt
    • 4.3 MacConkey agar med cefoperazon
    • 4.4 MacConkey Agar beredd med 10% havsvatten v / v
  • 5 referenser

foundation

MacConkey Agar

Grunden för detta medium kan förklaras genom beskrivningen av dess komponenter, eftersom var och en har ett syfte som bestämmer en egenskap av det.

Gallsalter och violett kristall

I den meningen har MacConkey agar en komplex komposition. Först och främst innehåller det gallsalter och violett kristall.

Dessa element är ansvariga för att hämma tillväxten av Gram-positiva bakterier och vissa krävande gramnegativa baciller. I sin tur gynnar den utvecklingen av gramnegativa baciller som inte påverkas av dessa ämnen. Det är därför det är ett selektivt medium.

Det sägs vara något selektivt jämfört med andra medier som också hämmar tillväxten av Gram-positiva bakterier och även av de flesta gramnegativa bakterierna.

Det är extremt selektivt för ett specifikt släkt, såsom TCBS agar för isolering av Vibrio cholerae och andra liknande halofila och alkalofila arter.

Peptoner, polypektoner och laktos

Innehåller substanser som ger de nödvändiga näringsämnena till mikroorganismerna som utvecklas i detta medium, såsom peptoner, polypektoner och laktos.

Laktos är huvudpunkten för mediet att vara ett differentialmedium, eftersom mikroorganismer som har förmåga att fermentera laktos kommer att utveckla starka rosa kolonier.

Vissa bakterier kan gärna laktos långsamt eller svagt, utveckla blekrosa kolonier och förbli positiv laktos.

De som inte fermenterar laktos använder peptoner som en energikälla, som producerar ammoniak, som alkaliserar mediet. Kolonierna som härstammar är därför färglösa eller transparenta.

PH indikator

Färgförändringen uppnås genom en annan väsentlig förening som har MacConkey agar. Denna förening är pH-indikatorn, som i detta fall är neutral röd.

Fermenteringen av laktos genererar produktionen av blandade syror. De surgör mediet vid ett pH under 6,8..

Detta medför att pH-indikatorn vänder mot en intensiv rosa färgton. Färgens intensitet kan variera beroende på det slutliga pH-värdet.

Destillerat vatten, natriumklorid och agar

Å andra sidan innehåller den destillerat vatten och natriumklorid som ger hydratisering och osmotisk jämvikt till mediet. Slutligen innehåller mediet agar, vilket är basen som ger konsistensen av fast medium.

Det framställda MacConkey agarmediet måste ha ett slutligt pH justerat till 7,1 ± 0,2..

beredning

För en liter MacConkey-agar bör 50 g av dehydratiserat medium vägas, placeras sedan i en fiola och lösas i en liter destillerat vatten. Efter 10 minuters vila värms den genom att blanda hela tiden tills den kokar i 1 minut.

Placera sedan fiola i autoklaven och sterilisera vid 121 ° C i 20 minuter. Vid slutet av tiden avlägsnas den från autoklaven och får svalna till en temperatur av 45 ° C, serveras sedan i sterila petriskålar inuti en laminär flödeskåpa eller framför Bunsen-brännaren..

Låt solidisera och lagra i en platthållare inverterad och kyl till vid 2-8 ° C tills användning.

För att erhålla en MacConkey-agar som hämmar den svärjande effekten som produceras av Proteus-släktet används en låg-salt MacConkey-agar..

Användning av konventionell MacConkey agar

MacConkey agar ingår i alla uppsättningar av kulturmedia som är anordnade för såning av kliniska prover som tas emot i laboratoriet. Det är också användbart i livsmedelsmikrobiologi och miljömikrobiologi.

Mångfalden av gramnegativa baciller som växer i detta medium uttrycker fenotypiska egenskaper som hjälper en presumptiv diagnos av de aktuella arterna. Till exempel är koloniernas storlek, färg, konsistens och lukt några av de egenskaper som kan styra.

I denna miljö, arter av Escherichia coli, Klebsiella sp och Enterobacter sp producera starka rosa kolonier, omgiven av ett område av utfälld galla.

I så mycket bakterier som Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp och Hafnia sp De kan dyka upp utan färg efter 24 timmar eller blekrosa på 24 -48 timmar.

På samma sätt producerar släktet Proteus, Edwadsiella, Salmonella och Shigella färglösa eller transparenta kolonier.

Andra varianter av MacConkey agar

Det finns andra varianter av MacConkey agar som har särskilda ändamål. Därefter nämns de:

MacConkey agar med sorbitol

Detta medium utformades för att särskilja den enteropatogena stammen (Escherichia coli enterohemorragisk O157: H7) av resten av stammarna av Escherichia coli.

Detta medium förändrar kolhydratlaktosen för sorbitol. Stammarna av E. coli enterohaemorragisk O157: H7 skiljer sig från resten eftersom de inte fermenterar sorbitol och därför erhålls transparenta kolonier, men resten av stammarna E. coli om de fermenterar sorbitol och kolonierna är starka rosa.

MacConkey Agar utan kristallviolett eller salt

Denna agar skiljer sig mycket från klassisk MacConkey-agar, eftersom den inte har kristallviolett, kan Gram-positiva bakterier växa.

Å andra sidan hämmar frånvaron av salt utseendet att svärma på agar som produceras av vissa enteriska baciller, såsom de av släktet Proteus, och därmed underlätta isoleringen av alla närvarande bakterier, inklusive Gram-positiva bakterier.

MacConkey agar med cefoperazon

Denna variant av MacConkey agar utformades för att initiellt isolera Laribacter hongkongensis och senare insåg de att det var användbart för isoleringen av Arcobacter butzleri. ENBåda är svagt böjda negativa grambaciller resistenta mot cefoperazon.

Dessa bakterier har nyligen kopplats till som orsaker till gastroenterit och diarré som förvärvats hos asiatiska och europeiska individer, som framträder som två potenta framväxande patogener.

Antibiotikumet tillåter att hämma den medföljande floden i mag-tarmkanalen, vilket gynnar utvecklingen av dessa bakterier, förhindrar dem från att gå obemärkt, eftersom de kräver 72 timmar att växa.

MacConkey Agar beredd med 10% havsvatten v / v

Denna variant är användbar för utvärdering av bakteriella hälsoindikatorer för fekal kontaminering, inklusive totala koliformer och fekala koliformer i rekreations saltvatten (stränder och vikar).

Cortez et al. 2013 visade att mediet framställt på detta sätt väsentligt ökar återhämtningen av dessa mikroorganismer i saltlösningsmiljön jämfört med användningen av MacConkey agar framställd med destillerat vatten..

Detta beror på att det modifierade mediet stimulerar tillväxten av bakterier som är fysiologiskt i ett viloläge "livskraftigt men inte odlingsbart", därför kan de inte återvinnas i konventionella medier.

referenser

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Användning av cefoperazon MacConkey agar för selektiv isolering av Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar." Wikipedia, den fria encyklopedin. 4 april 2018, 18:16 UTC. 29 dec 2018, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnos av Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Panamericana S.A Redaktionell.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier som är beredda med havsvatten på hälsoindikatorer i marina vatten i Chichiriviche spa, Falcón-staten, Venezuela. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. Universitetet i Cadiz, 2: a upplagan. UCA Publications Service.