Cetrimida agar foundation, förberedelse, användningar



den cetrimidagar eller cetrimid är ett selektivt fast odlingsmedium, utformat för isolering av Pseudomonas aeruginosa. Det bygger på att lyfta fram pigmentproduktionen som är karakteristisk för denna art och utvecklades från modifieringen av Tech agar, skapad av King, Ward och Raney.

Den ursprungliga formeln innehöll magnesiumkloridsalter, kaliumsulfat, pankreatisk gelatinutsläpp och agar-agar. Modifieringen av formeln bestod av tillsatsen av cetrimid (cetyltrimetylammoniumbromid) och glycerol.

Cetrimidagar är användbar för den mikrobiologiska studien av prover där närvaron av Pseudomonas aeruginosa. Observera att denna bakterie är av yttersta vikt, eftersom även en del av den normala miljö mikroorganismer, uppträder ofta som en opportunistisk patogen.

Därför är ett av de vanligaste problemen som orsakas av detta bakterie nosokomiella infektioner, det vill säga de som uppträder inom sjukhusmiljön, angriper patienter som har deprimerat immunförsvar..

Dessutom, på grund av affiniteten hos denna organism med fukt, vita mer sårbara kontamination de är: andningsutrustning, mediciner, nebulisatorer, fontäner, luftkonditioneringar, desinfektionsmedel, tvållösningar, injicerbara lösningar, öppna sår , katetrar, urinskatetrar, bland andra.

I den meningen är cetrimidagar användbar för att utföra mikrobiologiska kontroller och grödor till de tidigare nämnda namnen.

index

  • 1 Stiftelsen
    • 1.1 Tolkning
  • 2 Framställning
  • 3 användningsområden
  • 4 utsäde
  • 5 begränsningar
  • 6 Kvalitetskontroll
  • 7 referenser

foundation

Cetrimidagar är baserad på medlets förmåga att främja tillväxten av P. aeruginosa, stimulera produktionen av sina pigment och hämmar i sin tur tillväxten av andra mikroorganismer.

Dessa egenskaper beror på den funktion som varje komponent uppfyller. Den närvarande gelatinpeptonen tjänar som en källa av kväve, vitaminer och mineraler. Glycerol eller glycerin fungerar som kolkälla.

Cetrimid (cetyltrimetylammoniumbromid) är för sin del ämnet som hämmar tillväxten hos andra bakterier än P. aeruginosa, inklusive andra arter som tillhör samma släkt.

Inhibition sker eftersom cetramid verkar som ett katjoniskt tvättmedel, destabiliserar plasmamembranet hos de flesta bakterier, med undantag för P. aeruginosa och några andra som lyckas överleva.

Å andra sidan innehåller den magnesiumklorid och kaliumsulfat. Dessa föreningar stimulerar fenotypiskt uttryck relaterat till kapaciteten hos Pseudomonas aeruginosa av att producera olika pigment, bland dem: pyocyanin, pioverdin, piorubin, piomelanin och fluorescein. Slutligen innehåller den agar-agar, vilket ger den solid konsistens.

tolkning

Tolkningen av den tillväxt som erhålls i denna agar görs på följande sätt:

Observera, släta, runda kolonier med regelbundna kanter, som producerar blå-grön, grön, brun eller rödaktiga pigment, mer fruktig lukt emission (aminoacetofenon), är en presumtiv resultat av närvaron av denna bakterie i nämnda prov.

Å andra sidan är det en indikation på P. aeruginosa Observationen av ett ljusgulgrönt pigment på kolonierna när plattan utsätts för ultraviolett ljus.

Det bör noteras att varje observerad färg beror på produktion av ett specifikt pigment. Den blå-gröna pigmentet motsvarar pyocyanin produktion, att pyoverdin grön, rödaktig att piorrubina, brunt till grönaktig piomelanina och ljusa gul-fluorescens under ultraviolett ljus till fluorescein.

beredning

Väg 43 g av dehydratiserat medium och lös upp i destillerat vatten. Tillsätt 10 ml glycerol. Ta blandningen till en värmekälla. Låt koka i några minuter tills fullständig upplösning.

Autoklaver vid 121 ° C i 15 minuter. Låt stå och servera i sterila petriskålar när temperaturen är omkring 50 ° C.

Låt solidisera, invertera, beställa i plaquers och förvara i kylskåp tills användning. För att plantera cetrimidagarplattor ska de avlägsnas från kylskåpet i förväg och tillåtas ta rumstemperatur..

Det slutliga pH-värdet i mediet bör vara 7,2 ± 0,2.

Färgen på det dehydratiserade mediet är beige och preparatet är ogenomskinligt vitt.

tillämpningar

Cetrimidagar kan användas för att plantera alla typer av prover där närvaron av Pseudomonas aeruginosa. Därför är det användbart på alla områden inom mikrobiologi (miljö, industri, klinik, vatten och mat).

Det är mycket viktigt att analysera sjukhusmiljöer och kunna tillämpa korrigerande förmedlas, eftersom denna mikroorganism når patienter genom utrustning, mediciner, lösningar och förorenade ingångar användas av patienten.

På detta sätt kan mikroorganismen infektera det nedre luftvägarna, urinvägarna och sår hos immunsupprimerade patienter.

Kolonifält kan också göras P. aeruginosa i mikrobiella gränsvärden.

planterade

Cetrimidagar kan användas som primärkultur. Plattan ympas i en av dess kanter och därifrån fördelas den genom utmattning till resten av plattan. Vätskeprover kan sås på ytan med en drigalski-spatel.

Plattorna inkuberas i aerobios vid 37 ° C under 24 h inkubation.

begränsningar

-En liten procentandel av stammar av  Pseudomonas aeruginosa producerar inte pyocyanin, så du kan tolka en falsk negativ.

-Vissa arter av Pseudomonas av klinisk betydelse hämmas i detta medium.

-Trots att man observerade de egenskaper som beskrivs för Pseudomonas aeruginosa, De måste bekräftas med ytterligare identifieringstester. Ett test som inte borde saknas är oxidas testet, det ska vara positivt.

-Vissa enterobakterier kan växa i detta medium och utveckla ett gult pigment, men det skiljer sig från Pseudomonas aeruginosa i vilken när plattan utsätts för ultraviolett ljus finns ingen fluorescens.

-Serratia marcescens lyckas utveckla och producera ett rosa pigment.

-Om placken som utsöndras med cetrimidagar utsätts för en tid vid rumstemperatur, kommer stammarna av P. aeruginosa de kan förlora fluorescensen observerad under ultraviolett ljus, men egenskapen utvinns om den inkuberas vid 37 ° C.

Kvalitetskontroll

För att testa den korrekta funktionen av cetrimidagar kan kontrollstammar användas, såsom: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 och Staphylococcus aureus ATCC 25923.

De förväntade resultaten är:

  • till P. aeruginosa god tillväxt, med blågrönt pigment och positivt fluorescein.
  • S. maltophilia och S. aureus kommer att hämmas delvis eller helt.
  • Det förväntas att Escherichia coli hämmas fullständigt.

referenser

  1. Callicó A, B Cèdre, Sifontes S, Torres V, Pino och Callis A, Esnard S. Fenotypisk karakterisering och serologiska kliniska isolat av Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laboratorier Conda Pronadisa. Cetrimidagarbas. 2014. Tillgänglig på: condalab.com
  3. Laboratorier Britania. Cetrimida agar. 2015. Finns på: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD-pseudoselagar (cetrimidagar). 2013. Finns på: bd.com
  5. Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimidagar. 2009. Tillgänglig på: http://f-soria.es