Vad är Simple Staining? Toppfunktioner



den enkel färgning är ett snabbt och enkelt färgningsförfarande där ett enda färgämne används, det är därför det kallas enkelt. Det används huvudsakligen för att bestämma morfologin och organisationen av celler som finns i ett prov.

Naturligtvis har cellerna inte färg, så det är nödvändigt att göra dem synliga på något sätt när de observeras i mikroskopet.

Det är viktigt att betona att färgämnena som används vid enkel färgning måste vara grundläggande med positiv laddning (katjonisk), så att de kan spontant binda till cellväggen och cytoplasma.

Dessa cellulära strukturer är negativt laddade. Det är därför färgen, positivt laddad, lockas till cellerna och binder dem spontant. Således färgas alla celler som är närvarande i ett prov snabbt.

Färgämnen används vid enkel färgning

Det finns flera grundläggande färgämnen som kan användas i mikrobiologilaboratoriet. De mest använda är:

- Methylenblå.

- Kristallviolett.

- Malakitgrön.

- Grundläggande fuchsin.

Alla dessa färgämnen fungerar bra i bakterier eftersom de har positivt laddade (katjoniska) färgade joner (kromoforer).

Färgningstiderna för de flesta av dessa färgämnen är relativt korta. De sträcker vanligen från 30 sekunder till 2 minuter, beroende på färgens affinitet.

Det är viktigt att komma ihåg att innan färgning av ett prov genom enkel färgning måste det förlängas och fixeras till glasrutschbanan (glidbanan); Det utökade och fixerade provet kallas ett smet.

De 6 stegen för att utföra en enkel färgning

Steg 1

Placera bilden på ett färgstativ och använd önskat färgämne. Lämna motsvarande tid.

Normalt tar enkel färgning några sekunder eller några minuter, beroende på vilken färg som används.

observation

I detta steg är det viktigt att inte överskrida den rekommenderade tiden för färgämnet som används, eftersom kristaller kan bildas på arket, vilket producerar det som är känt som "artefakter" som förvränger cellernas morfologi.

Steg 2

Tvätta försiktigt smeten av glidglaset med destillerat vatten från en flaska, eller med kranvatten som strömmar långsamt, tills avrinningen blir transparent. Det tar vanligtvis 5 till 10 sekunder.

observation

Applicera inte vattenströmmen direkt på smeten för att förhindra att densamma skadar provet.

Om du inte har destillerat vatten kan du använda kranvatten utan problem eftersom det inte påverkar färgresultatet.

Steg 3

Torka gliden med absorberande pappershanddukar i en riktning och utan att gnugga. Se till att botten på bilden är ren.

Steg 4

Observera det färgade smetet i mikroskopet. Börja med de mest avlägsna målen att korrekt lokalisera det område du vill observera mer detaljerat. Ändra målet att komma närmare och närmare provet.

observation

För användning av linsen med högsta förstoring (normalt 100X), bör nedsänkningsolja användas, eftersom det hjälper ljuset att tränga in bättre och bilden blir skarpare. Det är inte nödvändigt att använda en täckglas.

Steg 5

Slutligen kassera alla prov i en lämplig behållare som är korrekt märkt som "biohazard".

referenser

  1. (2001). Mikrobiologiska tillämpningar: Laboratoriehandboken i allmän mikrobiologi (8 th red.). McGraw-Hill Companies.
  2. Harisha, S. (2006). En introduktion till praktisk bioteknik (1st). Firewall Media.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Preliminär färgning av bakterier: Enkla fläckar. Aktuella protokoll i mikrobiologi, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamos laboratorium grundar sig på mikrobiologi (10th). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorieövningar i mikrobiologi (5 th). McGraw-Hill Companies.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Mikrobiologins principer (1st). Tata McGraw-Hill Education.