Biokemiska tester typer, vad de är för och vikt



den biokemiska test I mikrobiologi är de en uppsättning kemiska tester som utförs på de mikroorganismer som finns i ett prov för att identifiera dem. Dessa mikroorganismer är vanligtvis bakterier. Det finns ett stort antal biokemiska tester tillgängliga för en mikrobiolog.

Valet av dessa test är emellertid baserat på preliminära fynd, såsom Gram-färgmönstret och tillväxttecken som tillåter bakterierna att tilldelas en viss kategori. De biokemiska testerna baseras huvudsakligen på de metaboliska egenskaperna hos varje typ av bakterier. 

Inte alla bakterier har samma egenskaper, så det undersöks om de har något särskilt enzym genom att tillsätta substratet och vänta på att reaktionen ska ske. Vanligtvis erhålls denna bestämning genom förändring av färg eller pH i odlingsmediet.

Mindre än 15 biokemiska tester behövs ofta för tillförlitlig identifiering av en bakterie upp till artnivå. Att utföra fler biokemiska tester kan öka förtroendet för identifiering.

De flesta av dessa biokemiska tester utförs i serum eller blodplasma. De kan emellertid också utföras i andra biologiska sekretioner, såsom urin, cerebrospinalvätska, pleurvätska och pall..

index

  • 1 klassificering
    • 1.1 Universal
    • 1,2 Differentials
    • 1.3 Specifikt
  • 2 Typer biokemiska test
    • 2.1 Katalasprovet
    • 2.2 Oxidasprovet
    • 2.3 Test av saltad mannitolagar (MSA)
    • 2.4 koagulastest
    • 2,5 ureasprovet
  • 3 Vad är de biokemiska testerna för??
  • 4 Betydelse
  • 5 referenser

klassificering

De biokemiska testerna kan klassificeras i tre grupper:

universell

Dessa är de tester som kan utföras på vilket prov som helst och som styr mikrobiologen på följande biokemiska tester som måste utföras för att få en tillförlitlig identifiering..

exempel

Katalas- och oxidasprovet.

differentialer

Dessa är de tester som utförs för att identifiera de mikroorganismer som finns i provet upp till artnivå.

Identifieringen görs på grundval av resultaten av en kombination av test, eftersom de enskilda resultaten inte är informativa nog för att göra identifieringen.

exempel

IMViC-tester och test av sockerutnyttjande.

specifik

De är specifika tester för en viss uppsättning arter eller att subtypa en art. Dessa tester görs vanligen för att bekräfta eller identifiera på underartsnivå. Individuella tester är självständiga.

exempel

Y-Glutamylaminopeptidas-testet.

Typer av biokemiska tester

Katalasprovet

Katalasprovet är ett test för att visa närvaron av katalasenzym genom att sönderdela väteperoxid i syre och vatten. En liten mängd bakterier läggs till en droppe väteperoxid (3%) på glidbanan.

Den katalas-testet är ett enkelt test som används av mikrobiologer för att identifiera bakteriearter och för att bestämma förmågan hos vissa mikrober för att sönderdela väteperoxid genom att producera enzymet katalas.

Om syrebubblor observeras betyder det att bakterien har katalasenzymet, eftersom det katalyserar sönderdelning av väteperoxid i syre och vatten. Det sägs då att organismen är katalas positiv (till exempel: Staphylococcus aureus).

Oxidasprovet

Detta test används för att identifiera mikroorganismer som innehåller enzymet cytokromoxidas (viktigt i elektrontransportkedjan). Det brukar särskiljas mellan familjerna Enterobacteriaceae och Pseudomadaceae.

Cytokromoxidas överför elektroner från elektrontransportkedjan till syre (den slutliga elektronacceptorn) och reducerar den till vatten. Oxidasprov ger artificiell elektrondonator och acceptormolekyler.

När elektrondonatorn oxideras genom verkan av cytokromoxidas blir mediet mörkt lila och anses vara ett positivt resultat. Mikroorganismen Pseudomonas aeruginosa är ett exempel på en positiv oxidasbakterie.

Saltat Mannitol Agar Test (MSA)

Denna typ av test är både selektiv och differentiell. MSA kommer att välja organismer som kan leva i miljöer med höga koncentrationer av salt, såsom arter av staphylococcus i motsats till arten av Streptococcus, vars tillväxt hämmas under dessa betingelser.

Differenskomponenten i detta test är sockermannitol. Organ som kan använda mannitol som livsmedelskälla kommer att producera biprodukt av jäsning, vilka är sura och kommer därför att sänka mediumets pH.

Medelets surhet medför att pH-indikatorn, fenolrött, blir gul. Exempel på bakterier som kan differentieras med denna metod är: Staphylococcus aureus (positiv eftersom det ferrerar mannitol) och Staphylococcus epidermidis (negativ eftersom mannitol inte jäsning).

Koagulastest

Koagulas är ett enzym som hjälper till att koagulera blodplasma. Detta test utförs på positiva gram-positiva och katalas-positiva bakterier för att identifiera Staphylococcus aureus (positivt koagulas) I själva verket är koagulas en virulensfaktor för denna bakterieart.

Bildandet av blodproppar runt en infektion orsakad av denna bakterie skyddar antagligen den från fagocytos. Detta test är mycket användbart när du vill skilja mellan Staphylococcus aureus av andra arter av staphylococcus vilka är negativa koagulaser.

Ureasprovet

Detta test används för att identifiera bakterier som kan hydrolysera karbamid, med användning av enzymet ureas. Det brukar användas för att skilja kön Proteus av andra enterala bakterier.

Hydrolysen av karbamid producerar ammoniak som en av dess produkter. Denna svaga bas ökar mediet på pH över 8,4 och pH-indikatorn (fenolröd) ändras från gul till rosa. Ett exempel på en positiv ureasbakterie är Proteus mirabilis.

Vad är de biokemiska testerna för??

Biokemiska tester i mikrobiologi används för att diagnostisera sjukdomar som orsakas av mikrober och att övervaka behandlingar som administreras för att bekämpa dem. Dessutom används de för screening av infektionssjukdomar och för deras prognos..

Biokemisk identifiering av mikroorganismer ger en uppfattning om vad dessa mikroorganismer har förmåga att eventuell diskriminering av olika stammar av samma art genom specifika biokemiska profiler.

Skillnader i specifika enzymatiska aktiviteter informerar om mikroorganismernas ekologi, fysiologi eller naturliga livsmiljö, vilket i vissa fall kan betraktas som viktig information.

betydelse

Strukturella skillnader när det gäller form, storlek och arrangemang av bakterier mycket liten hjälp i identifieringsprocessen eftersom det finns många arter av bakterier som har form, storlek och arrangemang liknande.

Av denna anledning är slutligen identifieringen av bakterier huvudsakligen baserad på skillnaderna i deras biokemiska aktiviteter.

Varje bakterieart har en väldefinierad uppsättning metaboliska aktiviteter som skiljer sig från alla andra arter. Dessa biokemiska "fingeravtryck" är egenskaper som kontrolleras av bakteriella enzymer.

Således är biokemiska tester viktiga eftersom de hjälper forskaren att korrekt identifiera de patogener som är närvarande i ett prov och på så sätt att kunna rekommendera lämplig behandling till patienten..

referenser

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinisk biokemi (8: e upplagan). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Biokemiska metoder för bakteriologi. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinisk biokemi (5: e upplagan). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktisk handbok för mikrobiologi (Andra ed.). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratoriemetoder i livsmedelsmikrobiologi (3: e upplagan). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktisk mikrobiologi. BI Publikationer Pvt Ltd.