Selenitbuljongens grund, förberedelse och användning



den selenitbuljong Det är ett selektivt flytande odlingsmedium. Den är designad av Leifson för berikning av prover där förekomsten av enteropatogena bakterier av släktet Salmonella är misstänkt..

Detta organ uppfyller kraven i American Public Health Association (APHA), och därför accepteras för utredning av salmonella i avföringsprover, urin, flytande eller fast mat, vatten, etc..

Den kemiska kompositionen som den besitter gynnar återhämtningen av dessa mikroorganismer och hämmar i sin tur andras tillväxt. Det är huvudsakligen giftigt för de flesta bakterier som tillhör Enterobacteriaceae-familjen. Det möjliggör också återhämtningen av Shigella-stammar och hämmar inte tillväxten av Pseudomonas och Proteus..

Den består av vattenfri natriumväteselenit, vattenfri natriumfosfat, peptoner och laktos. Det finns också en variant till vilken cystin tillsätts, varav dess selenit-cystinbuljong.

För närvarande användningen av Selenit cystin buljongen föredrages, eftersom högre procentuell återhämtning ekvivalent med den som observerades med andra selektiva medier för samma ändamål Salmonella, såsom natriumtetrationat buljong erhålles.

index

  • 1 Stiftelsen
  • 2 Framställning
    • 2.1 - Selena
    • 2.2 -Preparation av det kommersiella mediet
    • 2.3 Variant selenit-cystinbuljong
  • 3 användningsområden
  • 4 utsäde
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 begränsningar
  • 7 referenser

foundation

Peptonerna i buljongen tjänar som näringsämnen för korrekt utveckling av mikroorganismer. Salmonellastammar använder peptoner som källa till kväve, vitaminer och aminosyror.

Laktos är det fermenterbara kolhydrater, medan natriumselenit är inhibitorn som bromsar tillväxten av grampositiva bakterier och de flesta bakterier närvarande i tarmfloran, särskilt av familjen Enterobacteriaceae. Natriumfosfat är bufferten som stabiliserar mediumets pH.

I fallet med selenitbuljongvarianten som innehåller L-cystin är denna ytterligare förening ett reduktionsmedel som minimerar toxiciteten hos selenit, vilket ökar återhämtningen av salmonella.

beredning

-Selenitbuljong

Om du har komponenterna i blandningen kan du väga:

4 g vattenfritt natriumväteselenit.

10 g vattenfritt natriumfosfat.

5 gr peptoner.

4 g av laktos.

Lös upp föreningarna i 1 liter sterilt destillerat vatten. Det kan uppvärmas något för att lösa upp i sin helhet.

Vissa laboratorier exponerar mediet i 10 minuter i flytande ånga för att sterilisera det, eftersom autoklav inte ska användas. Om mediet är steriliserat kan det förvaras i kylskåp tills det används.

Den kan också framställas utan sterilisering och serverar direkt 10 till 15 ml till de sterila provrören.

I det här fallet bör det lämnas att vila och användas omedelbart. Eftersom mediet inte är sterilt kan det inte förvaras i kylskåp för senare användning.

-Framställning av det kommersiella mediet

Om det kommersiella mediet är tillgängligt vägs 23 g av det dehydratiserade mediet och löses i en liter sterilt destillerat vatten. Varm kort för att avsluta upplösningen. Sterilisera inte i en autoklav. Betjäna aseptiskt 10 eller 15 ml i sterila provrör.

Det slutliga pH-värdet i mediet bör vara 7,0 ± 0,2.

Det bör noteras att färgen på det dehydratiserade mediet är beige och preparatet är klart och genomskinligt bärnstensfärgat.

Variant selenit-cystinbuljong

Den innehåller samma föreningar av selenitbuljongen, men 10 mg cystin tillsätts. Resten av proceduren är exakt densamma som beskrivits ovan.

tillämpningar

Detta medium är speciellt att användas i epidemiologiska studier, i de fall sjukdomen inte befinner sig i sitt akuta stadium, asymptomatiska patienter eller friska bärare.

Isolationen av Salmonella-släktet är vanligtvis svårt, eftersom de vanligtvis förekommer att förorena proverna på ett knappt sätt. Att vara i små kvantiteter överlappas lätt av tillväxten av andra bakteriella släktar som finns i större mängd.

Å andra sidan utsätts råvaran med vilken bearbetade livsmedel bearbetas ofta bland annat för värme, dehydratiseringsprocesser, bland annat användningen av desinfektionsmedel, strålning och konserveringsmedel..

Därför mishandlas de Salmonella som finns i råvaran genom att produkten lämnas till de ovan nämnda industriella processerna. På samma sätt, vid kliniska prov såsom avföring kan stammarna vara svaga om de kommer från patienter som har behandlats med antibiotika..

Därför, till alla prov som misstänks ha förekomst av Salmonella vara pre-anrikad på laktos-buljong, och därefter anrikad i selenit optimera återhämtning selektiv, såsom SS-agar-agar xylos media, lysin deoxikolat (XLD ), enteric Hektoen agar (HE) och grön-ljus agar, bland andra.

planterade

För avföring tar prov 1 g prov och suspenderas i ett rör med 10-15 ml selenitbuljong. Om avföring är flytande ta 1 ml och suspendera i buljongen. För rektal swabs, tömma duftmaterialet i buljongen.

I prov av fast mat tar 1 gr och suspenderas i selenitbuljongen.

Blanda i flytande mat i lika delar med selenitbuljongen vid dubbel koncentration.

För urinprover centrifugera, kassera supernatanten, ta allt sediment och suspendera det i selenitbuljongen.

Buljongerna inkuberas vid 37 ° C under 24 timmars inkubation. Bakteriell tillväxt framgår av grumlighet. Ett ytterligare rör per prov kan också inkluderas för inkubering vid 42 ° C. Därefter sår selektivt fast medium från selenitbuljongen.

Kvalitetskontroll

För kontroll av sterilitet inkuberas en selenitbuljong från varje sats utan ympning vid 37 ° C under 24 timmar. Det förväntas att det inte finns någon turbiditet eller förändring av mediet färg.

För att kontrollera mediumets goda funktion kan kända stammar användas, såsom:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 och Proteus mirabilis ATCC 43071.

De förväntade resultaten är:

  • För de tre första bakteriestammen måste tillväxten vara tillfredsställande.
  • till Escherichia coli partiell inhibering.
  • För Proteus måttlig tillväxt.

begränsningar

Medium selenitbuljongen är giftig för mänsklig hud, därför bör direktkontakt undvikas.

referenser

  1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Bor-Rosel M, fransk-Monsreal J. Jämförelse odlingsmedier natriumselenit och natriumtetrationat, inkuberades vid både 37 ° C och 42 ° C under isoleringen av salmonella pall av bärare avföring. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
  2. Laboratorier Britania. Selenito Caldo. 2015. Finns på: britanialab.com
  3. Neogen Laboratories Selenito buljong Finns på: foodafety.neogen.com
  4. -Pedraza Gonzalez J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernandez -Aguirre E, Camacho Villarreal- J. mikrobiologiska isolering Salmonella spp. och molekylära verktyg för detektering. Hälsa, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Tillgänglig från: http://www.scielo.org.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnos av Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.