Nephelometry i vad det består av och applikationer
den nefelometri består i mätning av strålning som orsakas av partiklar (i lösning eller i suspension) och mäter sålunda kraften hos den utspridda strålningen i en annan vinkel än riktningen för den infallande strålningen.
När en partikel i suspension uppnås med en ljusstråle är det en del av det ljus som reflekteras, en annan del absorberas, en annan del omdirigeras och resten överförs. Det är därför som ljuset träffar ett transparent medium där det finns en suspension av fasta partiklar, ses suspensionen grumlig.
index
- 1 Vad är nephelometri??
- 1.1 Dispersion av strålning genom partiklar i lösning
- 1,2 Nephelometer
- 1.3 Avvikelser
- 1.4 Metrologiska egenskaper
- 2 applikationer
- 2.1 Detektion av immunkomplex
- 2.2 Andra tillämpningar
- 3 referenser
Vad är nephelometri??
Dispersion av strålning genom partiklar i lösning
I det ögonblick då en ljusstråle träffar partiklarna av ett ämne i suspension ändras strålens riktning sin riktning. Denna effekt beror på följande aspekter:
1.Dimensioner av partikeln (storlek och form).
2. Suspensionens egenskaper (koncentration).
3. Våglängd och intensitet av ljus.
4. Avstånd från infall ljus.
5. Detektionsvinkel.
6. Brevets refraktionsindex.
nefelometer
Nephelometern är ett instrument som används för att mäta partiklar som är suspenderade i ett flytande prov eller i en gas. Så en fotocell placerad i en vinkel av 90 ° med avseende på en ljuskälla detekterar strålningen av partiklarna närvarande i suspensionen.
Även det ljus som reflekteras av partiklarna mot fotocellen beror på partikelns densitet. Diagram 1 presenterar de grundläggande komponenterna som utgör en nephelometer:
EN. Strålningskälla
I nephelometri är det mycket viktigt att ha en strålningskälla med hög ljusutgång. Det finns olika typer, allt från xenonlampor och kvicksilverångampor, volfram halogenlampor, laserstrålning, bland annat.
B. Monokromatorsystem
Detta system ligger mellan källan för strålningen och kyvetten, så att förekomsten av strålkvetten med olika våglängder i jämförelse med den önskade strålningen undviks.
I annat fall skulle fluorescensreaktioner eller uppvärmningseffekter i lösningen orsaka avvikelser från mätningen.
C. Läser kyvett
Det är en generellt prismatisk eller cylindrisk behållare, och kan ha olika storlekar. I den här är lösningen i studien.
D. detektor
Detektorn ligger på ett visst avstånd (vanligtvis mycket nära tanken) och är ansvarig för att detektera strålningen dispergerad av suspensionens partiklar.
E. Läsningssystem
Generellt är det en elektronisk maskin som tar emot, konverterar och behandlar data, vilket i det här fallet är de mätningar som erhållits från studien utförd.
avvikelser
Varje mätning är föremål för ett felprocent, vilket huvudsakligen ges av:
Förorenade skopor: i kyvetterna reducerar något ämne som är externt till studielösningen, som ligger inuti eller utanför kyvetten, strålningsljuset på banan till detektorn (defekta kyvetter, damm som vidhäftas vid kuvettens väggar).
interferenser: närvaron av någon mikrobiell kontaminant eller grumlighet sprider strålningsenergin, vilket ökar dispersionsintensiteten.
Fluorescerande föreningar: Dessa är föreningar som, när de upphetsas av infallande strålning, orsakar felaktiga och höga avläsningar av dispersionstätheten.
Bevarande av reagens: systemets otillräckliga temperatur kan orsaka negativa förhållanden i studien och uppmana närvaron av grumliga reagenser eller utfällningar.
Fluktuationer i elkraft: För att undvika att strålningen är en felkälla rekommenderas spänningsstabilisatorer för jämn strålning.
Metrologiska egenskaper
Eftersom strålningsstyrkan hos den detekterade strålningen är direkt proportionell mot partiklarnas masskoncentration, har nephelometriska studier i teorin en högre metrologisk känslighet än andra liknande metoder (såsom turbidimetri).
Dessutom kräver denna teknik utspädda lösningar. Detta gör det möjligt att minimera både absorptions- och reflektionsfenomen.
tillämpningar
Nephelometriska studier upptar en mycket viktig position i kliniska laboratorier. Applikationerna sträcker sig från bestämning av immunglobuliner och proteiner av akut fas, komplement och koagulering.
Detektion av immunkomplex
När ett biologiskt prov innehåller ett antigen av intresse blandas det (i en buffertlösning) med en antikropp för att bilda ett immunkomplex.
Nephelometri mäter mängden ljus som sprids genom antigen-antikroppsreaktionen (Ag-Ac) och på detta sätt detekteras immunkomplex.
Denna studie kan utföras med två metoder:
Slutpunktens nephelometri:
Denna teknik kan användas för analys av slutpunkten, där antikroppen hos det studerade biologiska provet inkuberas i tjugofyra timmar.
Ag-Ac-komplexet mäts med användning av en nephelometer och mängden utspriddt ljus jämförs med samma mätning utförd före bildandet av komplexet.
Kinetisk nephelometri
I denna metod övervakas hastigheten av komplexbildning kontinuerligt. Reaktionshastigheten beror på koncentrationen av antigenet i provet. Här tas mätningarna som en funktion av tiden, så den första mätningen tas vid tiden "noll" (t = 0).
Kinetisk nephelometri är den mest använda tekniken, eftersom studien kan utföras på en timme, jämfört med den långa tidsperioden för slutpunktsmetoden. Dispersionsförhållandet mäts strax efter tillsats av reagenset.
Så länge reagenset är konstant anses mängden antigen närvarande vara direkt proportionell mot förändringshastigheten.
Andra tillämpningar
Nephelometry används vanligtvis i vattenkemisk kvalitetsanalys för bestämning av klarhet och för att kontrollera processerna för dess behandling.
Det används också för att mäta luftföroreningar, där partikelkoncentrationen bestäms av den dispersion som de producerar i ett infallande ljus..
referenser
- Britannica, E. (s.f.). Nephelometri och turbidimetri. Återställd från britannica.com
- Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetri & Nephelometri. Hämtad från pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Återställd från technochemical.com
- Morais, I. V. (2006). Turbidimetrisk och nekhelometrisk flödesanalys. Hämtat från repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Principer för nephelometri och turbidimetri. Hämtad från notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Essentials of Immunology & Serology. Albany, NY: Thompson Learning. Hämtad från books.google.co.ve
- Wikipedia. (N.D.). Nephelometry (medicin). Hämtad från en.wikipedia.org