Kromatogram för vad det är och typer



den kromatogram är en tvådimensionell grafisk rekord erhållen i ett absorberande medium, vilket visar separation av ämnen genom kromatografi. I kromatogrammet bildas ett synligt mönster, toppar eller fläckar som återspeglar den fysiska separationen av komponenterna i en blandning.

Den nedre siffran är ett kromatogram med tre toppar, A, B och C, av tre komponenter i provet separerade genom kromatografi. Det observeras att var och en av de tre topparna har olika höjd och placering i kromatogramets tidsaxel.

Axeln för ordinaten eller Y registrerar signalstyrkan (i millivolts mV i detta fall). Representerar registret, beroende på detektorn, av någon fysisk egenskap hos ämnet eller separat komponent i blandningen.

Höjden på toppen är proportionell mot koncentrationen av den separerade komponenten i provet i ett optimalt system. Således är det till exempel lätt att visualisera att komponent B är i större proportion än A och C.

På abscissen eller X-axeln representeras retentionstiden för komponenterna i provet eller blandningen. Det är den tid som går ifrån provets injektion tills det stannar, vilket är annorlunda för varje ren substans.

index

  • 1 Vad är ett kromatogram för??
    • 1.1 Identifiering av ämnen
    • 1.2 Klassificering av renhet av ämnen
    • 1.3 Kvantificering av ämnen
  • 2 typer
    • 2.1 Kromatogram på papper eller tunnfilm
    • 2.2 Kromatogram genererade av detektorer
  • 3 referenser

Vad är ett kromatogram för??

Det utgör den slutliga skivan över hela kromatografiprocessen. Härav erhålls parametrar som är av analytiskt intresse. Detta kan erhållas som en elektronisk fil, ett tryckt histogram eller i processstödet; på papper, till exempel.

Y-axeln alstras av signaldetektorer eller responsintensitet, såsom spektrofotometrar. En optimal analys av tiden, egenskaperna hos topparna eller de erhållna fläckarna är oumbärlig; storlek, plats, färg, bland annat.

Analyser av kromatogram kräver generellt användningen av kontroller eller standarder, identitetsämnen och känd koncentration. Analysen av dessa kontroller gör det möjligt att fastställa i jämförelse med de prover som är karakteristiska för komponenterna i det undersökta provet.

I kromatogrammet kan du observera och analysera hur separationen av komponenterna i en blandning utfördes. Dess optimala studie gör att man kan identifiera ett ämne för att visa sin renhet för att kvantifiera mängden ämnen som finns i en blandning, bland annat.

Den extraherade informationen kan vara av kvalitativ karaktär. till exempel när ämnen identifieras och deras renhet bestäms. Den kvantitativa informationen är relaterad till bestämningen av antalet komponenter i blandningen och koncentrationen av den separerade analyten.

Identifiering av ämnen

Genom att analysera resultaten från kromatogrammet kan olika substanser identifieras genom att jämföra retentionstiderna med den för de kända substanserna. Det kan observeras om de undersökta substanserna kör samma avstånd om de har samma tid som de kända ämnena.

Till exempel gör kromatogrammet det möjligt att upptäcka och identifiera i urinen hos idrottsmedicinska läkemedelsmetaboliter som stimulanter och steroider. Det är ett viktigt stöd i studien och undersökningen av vissa metaboliter som produceras av genetiska störningar hos nyfödda.

Kromatogrammet möjliggör detektering av halogenerade kolväten närvarande i dricksvatten, bland andra ämnen. Det är oumbärligt i laboratorieanalysen av kvalitetskontroll, eftersom det medger att detektera och identifiera de föroreningar som finns i de olika produkterna.

Klassificering av renhet av ämnen

I ett kromatogram kan du skilja mellan rena och orena ämnen. En ren substans skulle producera en enda topp i kromatogrammet; medan en oren substans skulle producera två eller flera toppar.

Genom tillräcklig justering av de betingelser under vilka kromatografi utförs kan två ämnen förhindras att bilda en enda topp.

Kvantificering av ämnen

Genom att analysera arean av kromatogrammets toppar kan koncentrationen av provets komponenter beräknas.

Därför är ytan av toppen proportionerlig mot mängden av substansen närvarande i provet. Dessa kvantitativa data erhålles i mycket känsliga system, såsom de som genererar gas eller vätskekromatografi, till exempel.

Typ

En av klassificeringarna av kromatogrammen är nära besläktad med de olika typerna av kromatografi, som alstrar motsvarande kromatogram.

Beroende på villkoren för utförande av detektorerna kommer bland annat kromatogrammet att variera i innehåll och kvalitet.

Kromatogram på papper eller tunnfilm

Kromatogrammet kan genereras direkt på papper eller tunnfilm, som direkt visar fördelningen eller distributionen av provets komponenter.

Det är mycket användbart för separation och studier av färgade substanser som har naturliga pigment, såsom klorofyll. Det kan utsättas för utvecklingsprocesser om ämnena inte har någon naturlig färg och är användbara för kvalitativa studier.

Kromatogram genererade av detektorer

Kromatogrammet kan också erhållas med användning av en detektor som registrerar svar, eller utgångsänden signal kromatografi. Såsom nämnts tidigare, är detta vanligen en spektrofotometer-detektor, en masspektrometer, automatiserade sequencers, elektrokemiska, etc..

Kromatogram som genereras i kolumner, oavsett om de är gaser eller vätskor, liksom de med hög upplösning i tunnskikt, använd detektorer.

Beroende på typ av detektor kan kromatogrammet klassificeras som differential eller integral, beroende på detektorens responsform.

Differentiellt kromatogram

En differentialdetektor mäter kontinuerligt kretsogrammets svarssignal, medan integraldetektorerna kumulativt mäter motsvarande signal.

Ett differentialkromatogram är ett kromatogram erhållet med en differentialdetektor. Bland dessa detektorer kan nämnas, till exempel spektrofotometrar och detektorer av förändringar i elektrisk ledningsförmåga.

Denna typ av kromatogram har visat resultatet av separationen av anjoner från ett prov, detekterat genom indirekt fotometri. Också samma resultat har erhållits för studier av joner, exempelvis med slutlig detektion genom ledimetri.

Den övre grafen visar exempel på en differential kromatogram erhållet genom automatiserade DNA-sekvenserare (deoxiribonukleinsyra). Grafen visar tydligt toppar av fyra färger, en färg för var och en av DNA-kvävebaserna.

Genom stöd av ett datorprogram den underlättar tolkningen av sekvensen av DNA-baser analyseras och analytkomplex.

Omfattande kromatogram

Det integrella kromatogrammet motsvarar det som erhållits med en integrerad detektor. I detta kromatogram framgår att produktionen av en enda komponent under undersökning. Inga toppar erhålls som i differentialen.

I det integrerade kromatogrammet erhålls en skiva med en form som beskrivs som ett steg. Denna form är den del av kromatogrammet som motsvarar mängden av en enda substans som lämnar kolonnen.

referenser

  1. Bhanot, D. (2013). Hur man läser till kromatogram? Hämtad från: lab-training.com
  2. Carey, F.A. (2006). Organisk kemi Sjätte upplagan. Mc Graw Hill
  3. Kromatografi idag. (2014). Vad är ett kromatogram? Hämtat från: chromatographytoday.com
  4. Mathias, J. (2018). En nybörjarhandledning: Hur man tolkar gaskromatografi-kromatografi Masspektrometri-resultat. Hämtad från: innovatechlabs.com
  5. Spanska kromatografiska sammanslutningen och relaterade tekniker. (2014). Kromatogrammet Återställd från: secyta.es
  6. Wikipedia. (2019). Papperkromatografi. Hämtad från: wikipedia.org